蒋勤勤在1994年考入上海戏剧学院的表演系配资证券，在校期间她积极参与校园戏剧的表演。毕业后，她的演艺事业迅速起步，凭借出演电视剧《西施》而正式进入了娱乐圈。这部剧中，她担任女主角，这也标志着她踏上了演艺之路。1996年，她主演了琼瑶剧《苍天有泪》，剧集播出后引起了广泛关注，蒋勤勤也因此逐渐在娱乐圈崭露头角。
1997年，她继续拓展电视剧领域，参演了《康熙微服私访记》。1998年，她主演了改编自梁羽生小说的电视剧《白发魔女传》，在剧中饰演练霓裳，凭借出色的表演获得了观众的认可。1999年，她参演了电视剧《风云雄霸天下》，并在剧中饰演第二梦。该剧在香港播出后取得了极大的成功，进一步扩大了蒋勤勤的知名度。
2000年，她主演了根据清末民初历史背景改编的电视剧《青河绝恋》，饰演沈心慈，并与赵文卓合作。与此同时，她也参演了热播剧《还珠格格3》，在剧中饰演夏盈盈，凭借精湛的演技再次引起了观众的关注。2001年，蒋勤勤参演了历史题材剧《末代皇妃》，在剧中饰演文绣，聚焦了许多历史事件。2002年，她出演了根据张爱玲小说改编的电视剧《半生缘》，饰演顾曼璐。接着，她于2003年在现代剧《耳光响亮》中出演了一位当代女性角色，拓展了她的演艺类型。
展开剩余77%2004年，她参演了讲述汉朝历史的电视剧《大汉巾帼》，在剧中饰演吕雉。2004年底至2005年初，蒋勤勤与陈建斌因合作电视剧《乔家大院》而相识。该剧由胡玫执导，讲述了晋商乔致庸的商道人生，蒋勤勤在剧中饰演陆玉菡，而陈建斌饰演男主角乔致庸。在拍摄过程中，两人因表演风格不同产生了分歧。陈建斌更倾向于现场临时调整台词，而蒋勤勤则坚持剧本原词，导致双方多次向导演反映问题。然而，剧集最终在2006年播出时取得了极高的收视率，两位主演的表演都得到了广泛好评。拍摄结束后，两人发展成为恋人。
2005年，蒋勤勤和陈建斌开始了恋爱关系。与此同时，陈建斌结束了与前女友吴越的五年恋情，吴越与陈建斌于2000年合作拍摄《菊花茶》时相识。分手后，吴越继续活跃于演艺圈，而陈建斌则与蒋勤勤建立了新关系。2006年2月22日，蒋勤勤与陈建斌低调登记结婚，尽管未举行婚礼仪式，也没有购买房产或举办宴席，两人选择了简单的结婚登记形式。结婚后，他们住在北京一间六平方米的小地下室公寓，生活条件相对简朴。
结婚初期，蒋勤勤和陈建斌的经济状况较为拮据。陈建斌主要依靠话剧和电视剧演出为生，而蒋勤勤则减少了工作量，专注于家庭事务。2006年，蒋勤勤参演了《七剑下天山》，饰演刘郁芳，该剧改编自梁羽生的小说。2007年1月8日，她生下了他们的长子，昵称为“老虎”。产后，她暂时退出演艺圈，全心照顾家庭。与此同时，陈建斌继续活跃在影视圈，他主演了2008年热播剧《三国》，在剧中饰演曹操，并凭此剧获得了多项奖项。
2009年，蒋勤勤复出参演了电视剧《大瓷商》，在剧中饰演赵瓷婉，讲述了陶瓷行业的故事。2010年，她参演了《完美丈夫》，饰演一位现代女性，探讨婚姻主题。2011年，尽管蒋勤勤未参与电视剧《后宫甄嬛传》的拍摄，但她始终在背后支持丈夫陈建斌的工作，该剧取得了巨大的成功，陈建斌的事业也随之迎来高峰。2012年，蒋勤勤参演了历史剧《西安事变》，在剧中饰演宋美龄，聚焦了历史事件。
2013年，她主演了电视剧《田姐辣妹》，饰演田佳慧，讲述了一位农村女性的成长故事。2014年，陈建斌执导的电影《一个勺子》上映，蒋勤勤参演并饰演了拉条子一角。该片获得了金马奖多项提名，并使得陈建斌凭此片获得了最佳新导演奖。2015年，她参演了民国题材的电视剧《海上孟府》，在剧中饰演孟文禄。
2016年，陈建斌主演的《平凡的世界》播出，而蒋勤勤则并未参演，但两人家庭生活依旧稳定。2017年，她参演了电视剧《九州缥缈录》，不过该剧因某些原因延期播出。2018年7月，蒋勤勤生下了次子，昵称为“兔子”，产后，她再次减少了工作量，专注于育儿。陈建斌则继续执导工作，并于2019年执导了电影《第十一回》，蒋勤勤在影片中饰演金多多，该片上映后得到了观众的好评。
2020年，蒋勤勤参演了悬疑剧《迷雾追踪》，在剧中饰演林雨虹。2021年，她主演了《当家主母》，饰演沈翠喜。该剧讲述了清代织造业的故事，陈建斌虽然没有直接参演，但在她的复出过程中一直给予支持。剧集播出后虽然引发了一些争议，尤其是关于动物保护的问题，但她的表演依旧获得了部分观众的认可。与此同时，陈建斌参演了电视剧《功勋》，饰演李延年，该剧也获得了好评。
2022年，蒋勤勤参演了犯罪题材的电视剧《罚罪》，饰演郑广梅。2023年，陈建斌执导并主演的电影《草木人间》上映，蒋勤勤在片中饰演吴太太，讲述了传销主题。该片上映后票房过亿，蒋勤勤的表现得到了观众的高度评价。通过该片，陈建斌的导演地位得到了进一步巩固。
蒋勤勤与陈建斌共同参与了多个项目，包括《乔家大院》《一个勺子》《第十一回》和《草木人间》等。此外，她也曾与导演张孝正于1998年合作过电视剧《白发魔女传》配资证券，并因此传出了绯闻。1999年，张孝正的婚姻因这些传闻而受到影响，最终以离婚收场。蒋勤勤曾对此做出回应，表示自己“清者自清”，并指责张孝正的前妻炒作。张孝正也否认了婚外情，但他的婚姻最终走到了尽头。
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